В.И. Дорожкин. «ВНИИВСГЭ» – филиал ФГБНУ ФНЦ ВИЭВ РАН М.М. Кулица. ГБУВ МО «Терветуправление №4»
В настоящее время для дезинфекции объектов ветеринарно-санитарного надзора создано еще недостаточно экологически безопасных, высокоэффективных и дешевых дезинфицирующих средств, позволяющих проводить аэрозольную дезинфекцию поверхностей животноводческих и птицеводческих помещений, оборудования и других объектов.
Поэтому необходимо продолжать как изыскание новых дезинфектантов, так и разработку высокоэффективных режимов и технологий их применения. Это является перспективным и актуальным направлением исследований в современной ветеринарной дезинфектологии [1–4].
Методы исследований – бактериологические, химические, физические
В лабораторных условиях опыты по изучению дезинфицирующей активности АБАЛДЕЗ® проводили согласно методическим указаниям «О порядке испытания новых дезинфицирующих средств для ветеринарной практики» (утв. ГУВ Госагропрома СССР 07.01.1987г.) [5].
Дезинфицирующую активность в производственных условиях изучали в соответствии с «Правилами проведения ветеринарной дезинфекции и дезинвазии объектов государственного ветеринарного надзора». М., 2002 г. [6].
Опыты проводили в герметизированных камерах объемом 8 и 30 м3. В работе использовали тест-культуры Е. соli шт. 1257; St. aureus шт. 209-Р; споры Bас. Cereus шт. 96; Mycobacterium шт. В-5.
Концентрация микроорганизмов (Е. соli и St. Aureus) 2 млрд микробных тел в 1 мл взвеси, а микобактерий и спор – 1 млрд/мл по оптическому стандарту мутности. Взвесь микроорганизмов и спор равномерно наносили на тест-объ-екты из дерева, бетона и металла в дозе 1 мл на один тест-объект площадью 100 см2.
Для определения влияния органических загрязнителей на бактерицидную активность испытуемого дезсредства в качестве белковой защиты на тест-объекты наносили по 0,3 г стерильного навоза крупного рогатого скота или стерильную сыворотку крови крупного рогатого скота.
Тест-объекты размещали на полу герметизированной камеры и закрепляли на стенах. Распыление дезсредства в камеру производили с помощью распылителя ПЭР - 1. Концентрация дезсредства составляла от 5 до 18%, экспозиция – 1,3,6 и 24 часа. Расход дезсредства на 1м3 камеры составлял 30 мл.
После окончания экспозиции с тест-объектов брали смывы ватными тампонами в пробирки со стерильной водой, далее производили посев смывов на питательные среды.
В качестве питательных сред для культивирования микроорганизмов использовали мясопептонный агар (МПА), солевой МПА, среду Эндо и среду Левенштейна – Йенсена (ФАСТ - 3л).
Выращивание микроорганизмов на МПА, солевом МПА и среде Эндо производили в термостате при температуре 37 ºС в течение 24–48 ч, а микобактерий на среде ФАСТ-3л в течение 5–7 суток. После выращивания производили учёт результатов исследований.
При отработке режимов обеззараживания воздуха в камеру распыляли культуры микроорганизмов, отбирали пробы воздуха, с помощью аппарата Кротова для определения исходной концентрации микроорганизмов, а затем рас-пыляли дезсредство в количестве 30 мл/м3 в определенной концентрации и после экспозиции в 10, 20, 30, 40, 50, 60 и 150 мин, отбирали пробы воздуха для бактериологических исследований. Посевы выращивали в термостате и делали учет выросших колоний.
Об эффективности дезинфекции судили по наличию или отсутствию роста микроорганизмов в смывах, взятых с тест-объектов, поверхностей и из воздуха после дезинфекции.
В качестве контроля служили смывы с тест-объектов и пробы воздуха до дезинфекции. Производственные опыты по апробации нового дезсредства были проведены в виварии лабораторного корпуса ФГБНУ «ВНИИВСГЭ» в боксах для содержания лабораторных (кролики, крысы, мыши) и сельскохозяйственных (куры, овцы, свиньи, молодняк крупного рогатого скота) животных, а также в хозяйствах Ставропольского края.
Результаты исследований
1. Разработка режимов и технологии аэрозольной дезинфекции поверхностей средством АБАЛДЕЗ® в камерных опытах. Дезинфицирующее действие аэрозолей средства АБАЛДЕЗ® изучали на 4-х группах микроорганизмов (по устойчивости к химическим дезсредствам): 1 – Е. соli, шт. 1257; 2 – St. Aureus, шт. 209-Р; 3 – Mycobacterium, шт. В-5; 4 – Bас. Сereus, шт. 96.
Дезинфицирующая активность аэрозолей средства АБАЛДЕЗ® при обработке тест-объектов, контаминированных Е. соli, шт. 1257 с белковой защитой приведена в таблице 1. Из данных таблицы 1 следует, что средство АБАЛДЕЗ® в 5%-ной концентрации и норме расхода 30 мл на 1 м3 камеры, при экспозиции 6 ч инактивирует кишечную палочку на тест-объектах из дерева и железа, а через 24 ч – на тест-объектах из бетона.
Результаты опытов по аэрозольной дезинфекции тест-объектов с белковой защитой, контаминированных St. Aureus, шт. 209-Р представлены в таблице 2.
Данные таблицы 2 свидетельствуют о том, что средство АБАЛДЕЗ® в 5%-ной концентрации и норме расхода 30 мл на 1 м3 камеры, при экспозиции 6 и 24 ч инактивирует Stарh. Аureus только на гладких поверхностях (железо), а 8%-ный полностью уничтожает стафилококк на гладких и шероховатых поверхностях через 6 ч при расходе 30 мл/м3.
Результаты опытов по инактивации Mycobacterium, шт. В-5 на контаминированных тест-объектах с белковой защитой аэрозолями дезсредства АБАЛДЕЗ® представлены в таблице 3.
Из данных таблицы 3 следует, что 8%-ный АБАЛДЕЗ® на тест-объектах с белковой защитой на поверхностях (стена, пол) инактивирует микобактерии за 24 часа.
Дезинфицирующая активность средства АБАЛДЕЗ® в камерных опытах при аэрозольной обработке тест-объектов, контаминированных спорами Bас. сereus, шт. 96, представлена в таблице 4.
Данные таблицы 4 показывают, что при обработке тест-объектов, контаминированных спорами Bас. Сereus, аэрозолями 5%-ного препарата АБАЛДЕЗ® споры не инактивируются. При использовании 8%-ного препарата – уничтожаются на тест-объектах из железа и дерева при экспозиции 24 часа, а при использовании 10%-ного препарата инактивируются за 24 ч на всех типах поверхностей.
В результате проведенных опытов отработаны режимы и технология аэрозольной дезинфекции гладких и шероховатых поверхностей, обеспечивающие инактивацию микроорганизмов 1–4 групп устойчивости к химическим дез-средствам в лабораторных опытах.
Эффективность разработанных режимов и технологии подтверждена актами комиссионных испытаний.
2. Разработка режимов и технологии обеззараживания аэрозолями препарата АБАЛДЕЗ® контаминированного микроорганизмами воздуха
Разработка режимов и технологии обеззараживания воздуха, контаминированного микроорганизмами, проведена в камерных опытах.
С этой целью в герметизированную камеру с помощью распылителя ПЭР-1 при давлении 3,5 атм распыляли взвесь (в объеме 2 млрд микробных тел/мл) культур микроорганизмов: Stарh. аureus, шт. 209-Р; Mycobacterium, шт. В-5; Bас. сereus, шт. 96.
Аппаратом Кротова отбирали пробы воздуха на среды: солевой МПА, ФАСТ-3 л и МПА в чашках Петри (исходный фон). Затем в камеру распыляли препарат АБАЛДЕЗ® в концентрации 5–8% и дозах 15–30 мл/м3 и после экспозиции производили бакпосев на определенную среду в чашках Петри. Посевы выращивали в термостате, а затем производили учет полученных результатов исследований.
Всего было проведено 10 опытов. Результаты опытов по разработке режимов и технологии обеззараживания воздуха аэрозолями препарата АБАЛДЕЗ® представлены в таблице 5.
Из данных таблицы 5 следует, что аэрозоли препарата АБАЛДЕЗ® в концентрации 5% и дозе распыления препарата 15 мл/м3 полностью инактивируют в воздухе камеры различные по устойчивости микроорганизмы за 30 мин, а споровые формы – за 45 мин. При дозе распыления АБАЛДЕЗ® 30 мл/м3 стафилококки и микобактерии уничтожаются за 15 мин, а Bac. сereus, шт.96 – за 30 мин.
3. Производственные опыты по апробации режимов и технологии аэрозольной дезинфекции птицеводческих помещений препаратом АБАЛДЕЗ®
Производственные и комиссионные опыты по апробации разработанных режимов и технологии аэрозольной дезинфекции проведены на ООО птицефабрика «Грачевская» Ставропольского края и в боксах вивария ФГБНУ «ВНИ-ИВСГЭ» для содержания сельскохозяйственных (птица, овцы, свиньи, телята) и лабораторных (кролики, крысы, мыши) животных. Всего проведено 6 опытов.
Смывы с поверхностей тест-объектов с белковой защитой, контаминированных взвесью 2 млрд/мл культуры Е. соli, шт. 1257, размещенных на полу и стенах помещений, брали до дезинфекции и после нее. Аэрозольную дезинфекцию проводили с помощью аэрозольного генератора ДАГ-2, 5%-ным препаратом АБАЛДЕЗ® из расчета 30 мл/м3, экспозиции 24 часа. Результаты исследований представлены в таблице 6. Из данных таблицы 6 следует, что после аэрозольной дезинфекции поверхностей помещения для выращивания ремонтного молодняка, контаминированных Е. соli, шт. 1257, 5%-ным раствором АБАЛДЕЗ® из расчета 30 мл/м3 и экспозицией 24 часа все поверхности и тест объекты были обеззаражены.
Заключение
На основании результатов производственных комиссионных опытов можно сделать заключение, что препарат АБАЛДЕЗ® в форме аэрозолей является эффективным средством для дезинфекции объектов ветеринарно-санитарного надзора и может применяться для профилактической и вынужденной дезинфекции.
Изучение дезинфицирующей активности аэрозолей препарата АБАЛДЕЗ® показало, что дезсредство в 5%-ной концентрации, норме расхода 30 мл/м3 и экспозиции 6 часов инактивирует Е. соli, шт. 1257 на тест-объектах из дерева и железа, а через 24 часа – на тест-объектах из бетона; Stарh. аureus, шт.209-Р – в 8%-ной концентрации при экспозиции 6 часов.
При аэрозольной дезинфекции тест-объектов, контаминированных Mycobacterium, шт. В-5, полная инактивация микобактерий происходит при воздействии 8%-ного АБАЛДЕЗ®. Расход препарата и в этом случае составляет 30 мл/м3, экспозиция – 24 часа.
Споры Bас. сereus, шт. 96, уничтожаются 10%-ным раствором препарата за 24 часа при расходе 30 мл/м3.
Таким образом, в результате проведенных камерных и производственных опытов отработаны эффективные режимы и технология аэрозольной дезинфекции объектов ветеринарного надзора препаратом АБАЛДЕЗ®.
Литература
1. Поляков А.А. Ветеринарная дезинфекция – М.: «Колос» – 1975. – 550 с.
2. Поляков А. А. Аэрозоли для дезинфекции в промышленном животноводстве / А. А. Поляков, B. C. Ярных, А. А. Закомырдин // Ветеринария. – 1981. – № 1. – С. 34–37.
3. Манькович Л. С. Новые отечественные дезинфектанты и их применение в практическом здравоохранении / Л. С. Манькович, Е. Е. Кудрявцева, А. А. Лебедев // Поликлиника. – 2005. – № 4. – С. 18
4. Аэрозоли в профилактике инфекционных заболеваний сельскохозяйственных животных / Ю.И. Боченин [и др.] // Ветеринарный консультант. – 2004. – N° 23–24. –С. 10–18.
5. «О порядке испытания новых дезинфицирующих средств для ветеринарной практики». Методические указания. – М. – 1987. – 90 с.
6. Правила проведения дезинфекции и дезинвазии объектов государственного ветеринарного надзора: Утв. МСХ РФ 15.07.2002 г. № 13–5–2/0525, – Москва, 2002. – 102 с.
7. Рекомендации по санитарно-бактериологическому исследованию смывов с поверхностей объектов, подлежащих ветеринарному надзору. – М. – 1988. – 8 с.
Сведения об авторах
В.И. Дорожкин, академик РАН, д.б.н., профессор, руководитель «ВНИИВСГЭ» – филиала ФГБНУ ФНЦ ВИЭВ РАН.
М.М. Кулица, к.в.н., доцент, ветврач ГБУВ МО «Терветуправление №4».